一、服務(wù)簡介
Luciferase報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)，并可通過熒光測定儀設(shè)備對luciferin氧化過程中釋放的生物熒光進行檢測，常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。
轉(zhuǎn)錄因子是一種具有特殊結(jié)構(gòu)、行使調(diào)控基因表達功能的蛋白質(zhì)分子，也稱為反式作用因子。某些轉(zhuǎn)錄因子僅與其靶啟動子中的特異序列結(jié)合，這些特異性的序列被稱為順式作用元件，轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域和順式作用元件實現(xiàn)共價結(jié)合，從而對基因的表達起抑制或增強的作用。熒光素酶報告基因?qū)嶒灒?/span>luciferase assay）是檢測這類轉(zhuǎn)錄因子和其靶啟動子中的特異順序結(jié)合的重要手段。
二、技術(shù)流程
1、合成或擴增目的片段并亞克隆至目標熒光素酶報告基因載體；
2、構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子表達載體或合成相應(yīng)mimicsl，均設(shè)置相應(yīng)對照；
3、培養(yǎng)目的細胞并接種于孔板中，將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達質(zhì)粒或相應(yīng)mimics共轉(zhuǎn)染細胞。
4、熒光素酶檢測熒光強度，并與空載對照比較；
5、分析數(shù)據(jù)并整理完整實驗報告
三、 服務(wù)說明
1、啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控：提供轉(zhuǎn)錄因子名稱及ID、靶基因名稱及ID；
2、miRNA靶基因驗證：提供miRNA名稱、物種信息、靶基因名稱及ID；
3、待測目的細胞，如無特殊要求默認使用293T細胞；
4、如有基因模板或構(gòu)建好的轉(zhuǎn)錄因子表達載體，可以提供
5、可按客戶要求提供構(gòu)建好的載體；
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的熒光素酶報告基因檢測服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。